Perché si usa?
Il TCBS Agar – Terreno di Monsur (tiosolfato-citrato-bile-saccarosio) è un terreno selettivo utilizzato per l’isolamento del Vibrio cholerae e di altri vibrioni da campioni clinici o alimentari.
Come funziona?
Il TCBS Agar -Terreno di Monsur contiene azoto e vitamine, forniti dall’estratto di lievito e dai peptoni.
Come agenti selettivi, sono presenti il citrato di sodio, il tiosolfato di sodio e la bile bovina; questi concorrono a formare un pH alcalino che, da una parte, inibisce la crescita dei Gram+, dall’altra facilita la crescita di Vibrio cholerae, in quanto è sensibile agli ambienti acidi. Inoltre, anche l’elevata concentrazione di sodio favorisce la crescita dei vibrioni, che sono organismi alofili. Il tiosolfato di sodio è una fonte di zolfo e, interagendo con il citrato ferrico, mette in evidenza la produzione di solfuro di idrogeno. Il blu di bromotimolo e il blu di timolo sono indicatori di pH.
Composizione del terreno
TCBS Agar
- Peptoni 10,0 g/L
- Estratto di Lievito 5,0 g/L
- Sodio Citrato 10,0 g/L
- Sodio Tiosulfato 10,0 g/L
- Ferro Citrateo 1,0 g/L
- Sodio Cloride 10,0 g/L
- Bile bovina 8,0 g/L
- Saccarosio 20,0 g/L
- Blu di bromotimolo 0,04 g/L
- Blu di timolo 0,04 g/L
- Agar 15,0 g/L
pH 8.6 ± 0.2 a 25°C
Preparazione del terreno
- Sospendere 19.5 grammi di terreno in 1 litro di acqua purificata;
- Riscaldare agitando e bollire per un minuto, fino a completo dissolvimento del terreno;
- Autoclavare a 121ºC per 15 minuti;
- Raffreddare a 45-50ºC e versare nelle piastre di Petri.
Risultati della crescita
| Microrganismo | Aspetto delle colonie |
| V. cholerae | Crescita da discreta ad eccellente, colonie circondate da zone gialle |
| V. parahaemolyticus | Crescita da discreta ad eccellente, colonie da verdi a verdi-azzurre |
| E. coli | Inibizione da parziale a completa, colonie piccole e traslucide |
| Ps. aeruginosa | Inibizione da parziale a completa, colonie blu |
Immagini
(vfu.cz)
Limitazioni del terreno
Alcuni ceppi hanno difficoltà a crescere su questo terreno, in quanto il fabbisogno nutritivo dei microrganismi non è identico. Pertanto, è consigliabile utilizzare anche terreni meno selettivi per rilevare la presenza di Vibrio spp.