RAPID’Salmonella Capsule/Supplement

Perché si usa?

RAPID’Salmonella Capsule/Supplement è un supplemento selettivo da addizionare al terreno Buffered Peptone Water (BPW) per l’isolamento di Salmonella spp. in prodotti alimentari umani ed animali ed in campioni ambientali. Inoltre, permette di differenziare Salmonella dagli altri membri della famiglia Enterobactericeae. 

Come funziona?

Il terreno RAPID’Salmonella garantisce elevate specificità e selettività grazie alla combinazione di due attività enzimatiche ed all’inibizione della crescita della flora microbica interferente. Si tratta di un terreno cromogenico che consente l’isolamento e l’identificazione di Salmonella spp. sulla base di reazioni colorimetriche di facile lettura. 

Le presunte colonie riconducibili al genere Salmonella assumono, nel giro di 24 ore, una colorazione magenta, a casa dell’attività dell’enzima C8 esterasi. 

Per differenziare Salmonella da altri batteri appartenenti alla famiglia delle Enterobacteriaceae, il terreno contiene un secondo substrato cromogenico: molti batteri interferenti, se non inibiti dagli agenti selettivi, producono colonie da viola a verde o incolori, per l’attività dell’enzima β-D glucosidasi.

Dunque, Salmonella forma colonie magenta, mentre Proteus, se non completamente inibito, produce colonie bianche. Altri batteri, come Citrobacter, formano colonie blu.

Preparazione del terreno

1. Diluire η g o η ml del campione in 9 x η ml di BPW.
2. Omogenizzare in un omogenizzatore Stomacher.
3. In base al supplemento utilizzato:
   • Se vengono utilizzate ‘RAPID’Salmonella QSP 250 ml capsules’: aprire n capsule e versarne il contenuto direttamente in n x 10 ml di BPW per ottenere una soluzione concentrata di supplemento. Aggiungere η x 0.4 ml della soluzione concentrata al campione diluito in BPW. Omogeneizzare agitando vigorosamente. 
   • Se vengono utilizzate ‘RAPID’Salmonella QSP 2.5 Litre capsules’: aprire n capsule e versarne il contenuto direttamente in un recipiente vuoto. Riempire con n x 10 ml BPW o n x 10 ml di Acqua distillata sterile. Omogenizzare agitando vigorosamente per ottenere un soluzione rossa concentrata. Aggiungere η x 0.04 ml della soluzione concentrata di supplemento al campione diluito in BPW. Omogeneizzare agitando vigorosamente.
   • Se vengono utilizzate ‘RAPID’Salmonella Supplement, 1 x QSP 100 analyses’: aprire la scatola e riempirla con 100 ml di BPW o Acqua sterile distillata. Omogenizzare agitando vigorosamente per ottenere un soluzione rossa concentrata. Aggiungere η x 0.04 ml della soluzione concentrata di supplemento al campione diluito in BPW. Omogeneizzare agitando vigorosamente.
4. Incubare a 41.5°C ± 1 °C per 18 h ± 2 h.
5. Piastrare ed incubare a 37°C ±1 °C per 24 h ± 2 h.

 La conferma può essere eseguita tramite Salmonella Latex test, Oxidase/OMNI-O/ONPG o IQ-Check ™️ Salmonella. 

Risultati della crescita

Immagini

Limitazioni all’utilizzo del terreno

• Alcuni ceppi di Salmonella (appartenenti alle specie Salmonella serovar Dublin e Salmonella bongori) possono mostrare un debole colore magenta a causa della bassa attività esterasica.
• Dopo la fase di incubazione finale, la piastra può essere conservata a 2-8 °C per 72 ore. Alcuni ceppi non-Salmonella (per esempio, Escherichia coli) possono sviluppare colonie di colore rosa dopo questa conservazione. Queste colonie dubbiose danno risultati negativi ai test di conferma.

Fonti

• Lauer W F e Martinez F L. RAPID’Salmonella chromogenic medium. Performance Tested Method 050701. J AOAC Int. 2009; 92(6): 1871-1875.
• Scheda Tecnica Bio-rad
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