Perchè si usa l’ALOA Agar?
ALOA Agar è un terreno selettivo differenziale e cromogenico per la determinazione di Listeria monocytogenes e Listeria spp. in campioni alimentari.
Composizione del terreno
Terreno ALOA (g/L)
- Peptone 18,00
- Triptone 6,00
- Estratto di lievito 10,00
- Sodio Piruvato 2,00
- Glucosio 2,00
- Magnesio glicerosolfato 1,00
- Magnesio solfato 0,50
- NaCl 5,00
- LiCl2 10,00
- Disodio idrogeno fosfato anidro 2,50
- 5-bromo-4-cloro-3-indolil- β -D-glucopiranoside 0,05
- Agar 13,5
Enrichment Supplement
- L- α -Fosfatidilinositolo 0,4g
Selective Supplement
- Acido nalidissico, sale sodico 0,004g
- Ceftazidime 0,004g
- Cicloeximide 0,004g
- Polimixina B solfato 15340UI
pH finale a 25°C: 7,2±0,2
Come funziona l’ALOA Agar?
L’azione selettiva del terreno è data sia dal Selective Supplement che dal LiCl2. L’azione cromogenica è data dal composto cromogenico X-glucoside, quale substrato per l’evidenziazione dell’enzima b-glucosidasi, comune a tutte le specie di Listeria. L’azione differenziale specifica è ottenuta con un substrato per la fosfolipasi C (PIPLC: phosphatidyl inositol phospholipase C), tipica di L. monocytogenes e di alcuni ceppi di L. ivanovii.
Preparazione del terreno
- Sospendere 70,6 g in 1 L di acqua distillata fredda;
- Portare ad ebollizione sotto agitazione;
- Autoclavare a 121°C per 15 minuti;
- Raffreddare il terreno fino a 47°-50°C;
- Aggiungere ALOA Enrichment Supplement preriscaldato a 47-50°C;
- Aggiungere ALOA Selective Supplement ricostituito con una 5 ml di una miscela etanolo/acqua distillata sterile in rapporto 1:1;
- Mescolare e distribuire in piastre sterili.
Risultati della crescita su ALOA Agar
Batterio | Caratteristiche colonie |
L. monocytogenes | colonie verdi-azzurre con alone opaco |
L. innocua | colonie verdi-azzurre senza alone |
L. ivanovii | colonie verdi-azzurre, con o senza alone |
E. coli | inibito |
E. faecalis | inibito |